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真核重组让研究更有价值

● 真核细胞本身的蛋白,尽量用真核表达,真核的表达环境使蛋白更有可能形成正确的结构,具备糖基化等修饰,更可能具有天然功能。而目前生命科学研究中,研究的模式生物大都为真核生物。


● 在真核细胞表达真核细胞的蛋白,折叠、修饰等方面更接近于天然蛋白,一般内毒素更低。这样试验过程才更接近真实的细胞活动。


● 如果你的运气足够好,发现你的实验结果可以为药物开发提供线索。恭喜你!如果你的实验是用真核表达的重组蛋白完成的,药企肯定会更感兴趣,因为这样的药物候选分子商业化风险更小。

细胞培养基的选择

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发布日期:2012-02-17 13:26 文章来源:丁香通
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关键词: 丁香园 生物专题 义翘神州 细胞培养   点击次数:

1.建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。

2.其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。

3.根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640 。

4.用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。

表 不同细胞系适用的培养基
细胞系 细胞类型 组 织 培养基
293 成纤维细胞 胚胎肾 MEM, 10% 热灭活马血清
IMR-90 成纤维细胞 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA
W1-38 成纤维细胞 胚胎肺 3月妊娠 MEM, 10% 胎牛血清
A549 上皮细胞 肺癌 F-12K, 10%胎牛血清
A431 上皮型 表皮细胞癌 DMEM, 10% 胎牛血清
BHL-100 上皮细胞 乳房 McCoy'5A, 10% 胎牛血清
BeWo 上皮滋养层 绒毛癌 F-12K, 15%胎牛血清
Caco-2 上皮细胞 结肠腺癌 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA
Chang 上皮细胞 肝脏 BME, 10% 小牛血清
HCT-15 上皮细胞 结肠直肠腺癌 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
HeLa 上皮细胞 子宫颈癌 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA(in suspension, S-MEM)
HEp-G2 上皮细胞 肝细胞癌 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA
HEp-2 上皮细胞 喉癌 MEM, 10% 胎牛血清;或RPMI-1640, 10% 胎牛血清
HT-1080 上皮细胞 纤维肉瘤 MEM, 10% HI 胎牛血清 和 NEAA
HT-29 上皮细胞 结肠腺癌 McCoy'5A, 10% 胎牛血清
JEG-2 上皮细胞 绒毛膜癌 MEM, 10% 胎牛血清
MCF7 上皮细胞 乳腺癌 MEM, 10% 胎牛血清 NEAA, 10ug/ml 胰岛素
KB 上皮细胞 口腔癌 MEM, 10% 胎牛血清和NEAA
Saos-2 上皮细胞 骨肉瘤 McCoy'5A, 15% 胎牛血清
WI-38 上皮细胞 胚胎肺 BME, 10% 胎牛血清
WISH 上皮细胞 羊膜 BME, 10% 胎牛血清
WS1   胚胎皮肤 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
HUVEC 内皮细胞 脐带 F-12K, 10% 胎牛血清 和 肝素盐 100 ug/ml
EB-3 淋巴样 Burkitt淋巴瘤 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
Raji 淋巴样 Burkitt淋巴瘤 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
IM-9 成淋巴细胞 骨髓瘤病人骨髓 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
Daudi 成淋巴细胞 淋巴瘤病人血液 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
H9 成淋巴细胞 T细胞淋巴瘤 RPMI-1640, 20% 胎牛血清
HL-60 成淋巴细胞 早幼粒细胞白血病 RPMI-1640, 20% 胎牛血清
Jurkat 成淋巴细胞 T细胞白血病 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
K-562 成淋巴细胞 骨髓性的白血病 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
U937 淋巴样 组织细胞淋巴瘤 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
KG-1 骨髓白细胞 红白血病病人骨髓 IMDM, 20% 胎牛血清
McCoy 成纤维细胞 小鼠 未知 MEM, 10% 胎牛血清
BALB/3T3 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清
3T6 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清
A9 成纤维细胞 小鼠 结缔组织 DMEM+10% 胎牛血清+6-硫鸟嘌呤(30μg/ml)+2,6-二氨基嘌呤(30μg/ml)
AtT-20 上皮细胞 小鼠 垂体肿瘤 F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清
Clone M-3 上皮细胞 小鼠 黑素瘤 F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清
I-10 上皮细胞 小鼠 睾丸癌 F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清
Y-1 上皮细胞 小鼠 肾上腺瘤 F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清
WEHI-3b   小鼠 骨髓单核细胞白血病 DMEM, 10% 胎牛血清
ES-D3   小鼠 多能胚胎干细胞 DMEM+ 15% 胎牛血清+100μmol/L 2-巯基丙醇
F9   小鼠 睾丸畸胎癌 DMEM, 15% 胎牛血清
BHK-21 成纤维细胞 仓鼠 GMEM, 10% 胎牛血清 或MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
HaK 上皮细胞 仓鼠 BME, 10% 小牛血清
CHO-K1 上皮细胞 仓鼠 卵巢 F-12, 10%胎牛血清
AR42J.   大鼠 胰腺肿瘤 Ham'sF-12K, 20%胎牛血清
BRL3A.   大鼠 Coon'sF-12K, 5%胎牛血清
Clone 9 上皮细胞 大鼠 肝脏 F-12K, 10%胎牛血清
H4--Ⅱ-E-C3 上皮样 大鼠 肝癌 F-12K, 10%胎牛血清
GH1 上皮细胞 大鼠 垂体肿瘤 F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清
GH3 上皮细胞 大鼠 垂体肿瘤 F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清
IEC-6 上皮样 大鼠 正常小肠 DMEM, 5% 胎牛血清,胰岛素0.1μg/ml
L2 上皮细胞 大鼠 F-12K, 10%胎牛血清
XC 上皮细胞 大鼠 肉瘤 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
LLC-WRC 256 上皮细胞 大鼠 199培养基, 5% 马血清
Jensen 成纤维细胞 大鼠 肉瘤 McCoy's 5A, 5% 胎牛血清
Rat2(TK-) 成纤维细胞样 大鼠 Rat2(TK-)克隆衍生 DMEM, 5% 胎牛血清,30μg/ml BrdU
PC12NGF 诱导的神经表型细胞 大鼠 肾上腺嗜铬细胞 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
L6   大鼠 骨骼肌成肌细胞 DMEM, 10% 胎牛血清
D-17 上皮细胞 骨肉瘤 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA
BT 成纤维细胞 鼻甲骨细胞 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA
MARC-145   猴肾 MEM或DMEM, 10%小牛血清
CV-1 成纤维细胞 非洲绿猴肾 MEM, 10% 胎牛血清
COS-1 成纤维细胞 MEM, 10% 胎牛血清
COS-3 成纤维细胞 MEM, 10% 胎牛血清
COS-7 成纤维细胞 非洲绿猴肾 MEM, 10% 胎牛血清
Vero 成纤维细胞 非洲绿猴肾 199培养基,5% 胎牛血清
B95-8 成淋样绒 EB病毒感染的白血病细胞 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
CRFK 上皮细胞 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA

编辑: cq

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