丁香园 | 丁香通 | 人才 | 会议 | 药学 | 博客 　
　点击次数：次

PCR技术介绍 更多 >>

热门点评 更多 >>

热循环仪介绍

转载请注明来自丁香园
发布日期：2011-11-28 17:33 文章来源：杭州朗基
分享到： 收藏夹 新浪微博 腾讯微博 开心网 豆瓣社区 人人网
关键词： 丁香园 生物专题 杭州朗基 热循环仪 发展 　 点击次数：

在早期的PCR时代，进行PCR循环是一个繁重的工作。首先，当时尚未出现商业化生产的耐热的聚合酶，可用的DNA聚合酶（来源于大肠杆菌的Klenow片段）每次当温度提高到将双链模板变性的温度时都会失活，意味着需要在每个循环中重新添加新鲜的聚合酶。其次当时由于还没有发明热循环仪，必须配备三个不同温度的水浴锅，这就意味着每隔30-60秒就需要将反应管从一个水浴锅转移到另外一个水浴锅，且这项劳动必须反复进行至少30次！

早期出现的用来做PCR实验的三个温度的水浴锅

自动化的PCR技术受益于两项革新：

1）从黄石国家公园的热泉中生活的嗜热的Thermus aquaticus菌分离出的耐热的Taq DNA聚合酶。因为Taq DNA聚合酶不会因PCR的高温而失活，因此只需往样本中加入一次，而非在每个循环中都要加入。

2）热循环仪的发明，使用计算机来控制PCR实验中不断重复的温度变化要求；

Cetus Instrument Systems公司于1985年12月推出的世界上首台自动化的PCR仪“Mr. Cycle”，包含多通道自动液相工作站和两个铝制样品台。

热循环仪（Thermocycler）也称作基因扩增仪或简称PCR仪，通过控制周期性的迅速加热和冷却含有反应液的PCR管，为PCR过程提供准确的温度条件。虽然相比以前的三温度点水浴锅，热循环仪的仪器结构变得越来越复杂，但说到底还是用来加热和冷却的仪器。

各种热循环仪的冷却系统、样品台容量（25孔、48孔、96孔、384孔等）和材质（铝制、银质）、样品槽数量（单槽、双槽、四槽）各不相同，可满足不同的需求。

为阻止反应液的蒸发，目前的热循环仪常配备有热盖，热盖可通过加热反应管的顶部维持特定的高温（常常达到105℃左右），起到阻止反应液的蒸发的效果。对于没有热盖功能的基因扩增仪，需要反应管的反应液上覆盖一层矿物油，以达到阻止反应液的蒸发的效果。

早期的热循环仪，升温温速率较慢，仪器体积较大，可存储的程序受限

  

现代化的热循环仪，升降温速率提高，仪器体积减少，可存储的程序增多  

触摸屏操作的热循环仪，升降温速率更高，操作简便，存储的程序很多，带有联电脑和联网功能

编辑: cq

以下网友留言只代表网友个人观点，不代表网站观点