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测序后序列不正确

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发布日期：2011-11-30 12:26 文章来源：杭州朗基
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关键词： 丁香园 生物专题 杭州朗基 PCR 测序 　 点击次数：

反应成分问题：

可能的原因 解决办法
   聚合酶的保真性不够    选择高保真性的聚合酶，如Pfu
   四种dNTP的浓度不相等    使四种dNTP浓度相等
   模板DNA降解    使用新鲜的模板 当分析或从凝胶中切割回收PCR产物时，限制紫外线照射时间
   Mg离子过量    使用能产生足够的产物量所需的最低Mg浓度

反应条件问题：

可能的原因 解决办法
   反应条件不好    减少循环数 降低延伸时间 减少Mg离子浓度

 

编辑: cq

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