C端测序
原理:
即在质谱中获得蛋白质肽段的碎片。肽段在质谱中的碎裂有一定规律,通常最容易断裂的是肽键位置,得到分别命名为b离子和y离子,得到这些离子的M/Z的图谱,分析图谱得到的蛋白质的C端序列。
仪器:
Thermo LTQ-Velos
ABI 4800 MALDI-TOF-TOF
样品要求:
含盐量: 挥发性无机盐<20mM;不挥发性无机盐<5mM
样品量:蛋白质总量>50pmol,纯度>90%
样品要已知氨基酸序列
实例分析:
某样品C端测序分析
理论的C端序列:GIPHLVLSPSTVFFGAFAL
图谱解析:根据以上图谱得到的样品C端序列为:GIPHLVLSPSTVFFGAFAL
常见影响测试的情况
1、 样品不纯
2、 样品量不够
编辑: helen