DIGE荧光差异凝胶电泳
Ettan DIGE荧光差异蛋白表达分析系统在传统双向电泳技术的基础上，结合了多重荧光分析的方法，在同一块胶上共同分离多个分别由不同荧光标记（Cy2，Cy3，Cy5）的样品，并第一次引入了内标的概念，极大地提高了结果的准确性，可靠性和重复性。在DIGE技术中，每个蛋白点都有它自己的内标，并且软件全自动根据每个蛋白点的内标对其表达量进行校准，保证所检测到的蛋白丰度变化是真实的。DIGE技术可检测到样品间小于10%的蛋白表达差异，统计学可信度达到95%以上。利用Ettan DIGE技术还可以对微量（少到5μg）样本进行蛋白质组学分析。
原理：
DIGE的工作流程如下：
优点：
1、相对于2D，在检测大量样品时，由于不同样品可以跑同一块胶，大大减轻了工作量。
2、检测灵敏度更高 Detection Limit = 125 pg protein，大大节约了样品，特别是不易得到的珍贵样品。
3、检测动态范围更大-Dynamic range 104 -105，
4、内标归一化 -- 采用内标而消除了胶与胶之间的差异造成的误差
5、统计学分析-- 利用DeCyder软件可以得到统计学可信的结果，极大降低操作者之间的偏差，并且将手工操作时间减少到几分钟。
仪器：
1st dimension:
IEF: IPG-PhorII (GE)
2nd dimension:
GE Ettan DALTsix (26x20cm)
Data acquisition:
GE Typhoon 9400 Scanner
Analysis software:
GE DeCyder for DIGE gels
编辑: helen
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