等电点测定
方法:平板等电聚焦
原理:蛋白质分子在含有载体两性电介质形成的连续而稳定的线性pH梯度中进行电泳。但不止是按照等电点不同被分离。
仪器:
GE MultiphorTM II Electrophoresis unit
Bio-Rad Model 111 Mini IEF Cell
样品要求:
液体:浓度>3mg/ml;体积>200ul;固体:质量>200ug
样品纯度>90%;含盐量<3 0mM;分子量:一般要求大于1000Da
实例分析:
某样品的等电点分析:
图谱解析:根据以上图谱解析得到某样品的等电点在4.6-4.8之间
常见影响测试情况:
1、蛋白质纯度不足
2、含盐量过高
3、蛋白质分子量太小,导致无法固定染色
编辑: helen