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等电点测定

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发布日期:2012-06-06 12:09 文章来源:丁香园
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关键词: 生物专题 蛋白 丁香园 丁香通 欧易 oebiotech   点击次数:


方法:平板等电聚焦

原理:蛋白质分子在含有载体两性电介质形成的连续而稳定的线性pH梯度中进行电泳。但不止是按照等电点不同被分离。

仪器:

GE MultiphorTM II Electrophoresis unit
Bio-Rad Model 111 Mini IEF Cell

样品要求:

液体:浓度>3mg/ml;体积>200ul;固体:质量>200ug
样品纯度>90%;含盐量<3 0mM;分子量:一般要求大于1000Da

实例分析:

某样品的等电点分析:


图谱解析:根据以上图谱解析得到某样品的等电点在4.6-4.8之间

常见影响测试情况:
1、蛋白质纯度不足
2、含盐量过高
3、蛋白质分子量太小,导致无法固定染色
 

编辑: helen

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