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真核重组让研究更有价值

● 真核细胞本身的蛋白，尽量用真核表达，真核的表达环境使蛋白更有可能形成正确的结构，具备糖基化等修饰，更可能具有天然功能。而目前生命科学研究中，研究的模式生物大都为真核生物。


● 在真核细胞表达真核细胞的蛋白，折叠、修饰等方面更接近于天然蛋白，一般内毒素更低。这样试验过程才更接近真实的细胞活动。


● 如果你的运气足够好，发现你的实验结果可以为药物开发提供线索。恭喜你！如果你的实验是用真核表达的重组蛋白完成的，药企肯定会更感兴趣，因为这样的药物候选分子商业化风险更小。

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细胞污染图片

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发布日期：2012-02-20 13:56 文章来源：丁香通
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关键词： 香园 生物专题 义翘神州 细胞培养 　 点击次数：

支原体污染电镜照片（X12k）

你的培养液应该一两天内很快变混浊．刚开始小虫杆状成串，不怎么动，多了以后就不成串了，移动迅速，是这样吗？如果是，细菌培养液是被洋葱佰克霍尔德菌污染了。

洋葱佰克霍尔德菌（Burkholderiacepacia）原属假单胞菌属，是植物病原菌，因引起洋葱患病而得名，是医院感染病原菌之一。

洋葱伯克霍尔德菌是一种广泛存在于土壤及水中，与医院感染密切相关的革兰阴性杆菌，尤其为免疫缺陷及肺囊性纤维化患者易感染细菌之一。它可以在无糖的培养基中生长。在医院环境中常可污染自来水、体温表、喷雾器、静脉导管、导尿管、静脉输液管等，造成院内传播，导致多种医院感染，如败血症、心内膜炎、肺炎、伤口感染、深部脓肿和眼结膜炎等，尤其采用导管植入进行治疗者，更容易引起感染。洋葱伯克霍尔德菌对多种抗菌药具有天然的耐药性。耐药现象严重，治疗可选择复方磺胺甲繟唑、哌拉西林,三唑巴坦、哌拉西林和头孢他啶等抗菌药物。

参考文献：洋葱伯克霍尔德菌86株的分布与耐药性 尤荣开，等 中国抗感染化疗杂志 2003年2月28日第3卷第1期

丁香园网友wangyz认为：

看到上面很多战友细胞都被霉菌污染了，而很多是由于培养箱污染的原故，我想说的是其实这种污染是很容易避免的，我养细胞近一年了，养过很多种细胞，还从来没发生过类似的情况，培养箱的水如上面有位战友所讲，加叠氮钠使其浓度到千分之零点二的（有剧毒，配置是小心勿沾到皮肤上）就可以防腐了，我们在第一使用培养箱或万一被污染的情况下通常的做法是在常规的用千分之一新洁尔灭和75%的酒精搽拭培养箱后，加入消毒过的水（普通的双蒸水高压即可，叠氮钠可先配成1%贮存浓度，用不着消毒因为微生物是不能成活的），在往培养箱中加水前放细胞室开紫外灯照20-30分钟，此时每500毫升的水加1毫升的贮存浓度叠氮钠，混匀，到入培养箱中即可。

上面的过程我想很多人是这么做的，应该没问题，至少你首次不会带入污染，我想提醒的是在每次从培养箱中取出细胞到显微镜下观察前，一定要打开细胞室的紫外灯照20-30分钟（手伸进培养箱前当然要用酒精棉球搽拭，不过一般都能做到），观察完将细胞放入培养箱前用酒精棉球搽拭细胞培养瓶后再放入。我经常看到有些人是一去细胞室先从培养箱中取出细胞观察，再做决定，如果需要处理则再开始打开细胞室的紫外等消毒。这样做是省事但极易带入细菌、霉菌等造成污染，因为你衣服上（哪怕你穿细胞室的工作服但没照过）以及细胞间的环境中就有细菌、霉菌等微生物，当打开培养时空气一流通这些微生物就有可能进入，而培养箱内的环境又极适合微生物的生长。所以我说宁可麻烦一点，但也值得！实验只要不因失误重做哪怕准备时间长一点做起来都算快的。

支原体污染

编辑: cq

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